自噬研究领域大咖下周四齐聚上海独家大揭密

曹 流 中国医科大学

演讲题目：细胞自噬与细胞稳态以及衰老相关疾病的发生发展

演讲摘要：

细胞稳态包括细胞结构的完整以及在此基础上的功能协调，它是维系新陈代谢的基本保障。在正常生命活动中，细胞稳态时刻受到来自体内外有害因素的威胁，从而引发机体的生理状态向病理生理状态的迁移，最终导致包括衰老与肿瘤等相关联疾病的发生发展。

随着生物进化，生命个体获得了一系列维护细胞稳态的机制，包括：自噬；细胞凋亡；细胞老化以及细胞周期检验等自我保护系统，担负着维护细胞稳态的重要使命。我们通过对细胞自噬相关因子基因敲除鼠模型的系列研究阐明：自噬功能缺陷导致DNA损伤以及基因组不稳定，进而触发细胞周期阻滞/细胞凋亡/细胞老化，导致生物个体衰老加速。

我们研究提示细胞自噬反应的“动态平衡”是维护细胞稳态的保障, 细胞稳态维护机制的“平衡失调”将导致肿瘤与衰老等相关联疾病的发生。因此，细胞稳态有赖于维护细胞稳态机制的“功能和谐”，而有效地调控细胞稳态维护机制的平衡稳定，将是延缓衰老与防治肿瘤发生发展的关键。

乐卫东

演讲题目： Chronic sleep impairment promotes abnormal protein aggregation and induces autophagy in Alzheimer’s disease

演讲摘要：

Misfolding protein aggregation, such as senile plaques and neurofibrillary tangles, is the most specific pathological characteristic of Alzheimer’s disease (AD). It is well known that autophagy is involved in protein degradation process. Our previous studies demonstrated that chronic sleep deprivation can affect cognitive ability, and exacerbate abnormal protein aggregation in APPswe/PS1deltaE9 transgenic mouse model of AD. Recently we are investigating whether autophagy is involved in the chronic sleep deprivation-induced AD pathology. We implemented chronic sleep deprivation treatment on APPswe/PS1deltaE9 and normal wild-type mice, and observed robust change of senile plaques, APP and Aß in the brains of the transgenic mice. More importantly we found that chronic sleep deprivation causes significant changes in several key molecules of autophagy pathway including LC3 puncta, Beclin-1, LC3-II, p-MTOR, p-AKT1 and p-p70S6K in the transgenic mouse brain. Application of autophagy modulators such as carbamazepine and valproate can attenuate the changes in autophagy activity and reduce the AD-related neuropathology. Our results have demonstrated that chronic sleep deprivation is a risk factor for AD and alteration in autophagy pathway may play an important role in the disease process.

王建荣 苏州大学

演讲题目：Autophagic mechanism counteracting leukemogenesis

演讲摘要：

Autophagy, a unique cytoplasmic metabolic machinery involving lysosomal degradation, is required for hematopoietic stem cell multilineage differentiation that protects against leukemogenesis, but the underlying mechanism is unknown. Using a conditional mouse model, we uncovered a mechanistic link between autophagy and hematopoietic stem cell differentiation. Physiological autophagy activity was found to be inversely correlated with Notch signaling during hematopoietic stem cell differentiation whilst pathologically low autophagy activity was associated with upregulated Notch signaling in dysfunctional hematopoietic stem cells of leukemia patients. Furthermore, we show that autophagy directly degrades intracellular Notch whereas conditional autophagy defects lead to elevated intracellular Notch and its downstream targets as well as failed hematopoietic stem cell differentiation. Hematopoietic stem cell differentiation potential, however, was restored in an autophagy defective system when Notch signaling was pharmacologically or genetically abrogated. Finally, we identified mitochondrial reactive oxygen species as an upstream trigger for autophagy to downregulate Notch signaling and drive hematopoietic stem cell differentiation. Hence, in the cause of development when mitochondrial ROS are progressively produced, autophagy is triggered by the ROS to target Notch signaling to sustain hematopoietic stem cell differentiation. Autophagy dysfunction is attributed to the differentiation blockades which are often the cause of hematological malignancies. Therefore, our present findings provide a critical insight into the current mechanistic understanding of physiological and pathological connections between autophagy and hematopoietic stem cell differentiation, thereby proposing a novel mechanism by which autophagy maintains hematopoiesis and protects against leukemogenesis.

苗俊英 山东大学生命科学学院

演讲题目：长非编码RNA—TGFB2-OT1调控细胞自噬和炎症的机制

演讲摘要：

转化生长因子β2（transforminggrowthfactor,beta2，TGFB2）重叠转录本1（TGFB2overlappingtranscript1，TGFB2-OT1）是我们课题组新发现的一种长非编码RNA，它来源于的TGFB2的3’非翻译区。我们发现TGFB2-OT1可以调节血管内皮细胞（VEC）的自噬（Autophagy.2014Jun;10(6):957-71.）。在此基础上，我们深入研究了TGFB2-OT1的表达调控、作用机制及其与疾病的关系。研究结果表明：（1）两种炎症诱导因素—脂多糖（LPS）和氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）均可以明显上调TGFB2-OT1，化学小分子3BDO可以降低TGFB2-OT1的表达，并可以抑制LPS和oxLDL的作用；（2）LPS和oxLDL上调NUPR1，而NUPR1促进TIA1的表达，TIA1负责TGFB2-OT1剪接；（3）TGFB2-OT1可以调节3种miRNA—MIR3960、MIR4488和MIR4459的水平；（4）TGFB2-OT1作为竞争性的内源RNA（ceRNA），通过与MIR3960、MIR4488和MIR4459结合调节miRNA的靶基因神经酰胺合成酶1（CERS1）、N-乙酰转移酶8样蛋白（NAT8L）和La核蛋白结构域家族成员1（LARP1）的表达，CERS1和NAT8L可以通过影响线粒体的功能参与自噬；（5）TGFB2-OT1通过上调LARP1促进SQSTM1的表达，进而促进NFKB和CASP1的活化，因此，促进炎性因子IL6，IL8和IL1B的产生（Autophagy2015Accepted）

杨怡 杭州师范大学

演讲题目：Beclin 1对凋亡和自噬的调控作用

演讲摘要：

细胞凋亡和细胞自噬作为调控细胞程序性死亡的两种重要方式，广泛存在于真核细胞的生理病理过程中。尽管凋亡与自噬的特征及机制不同，但两通路并不是独立并行的，两者有共同的刺激因子和调节蛋白，两通路之间存在着错综复杂的对话。

Beclin 1是自噬关键调控蛋白之一，参与自噬体膜形成。近期，大量研究结果指出Beclin 1是Caspase家族蛋白酶的全新底物，可被Caspase剪切。剪切后的Beclin 1失去自噬调节功能，转而加剧凋亡进程。因而，Beclin 1对细胞凋亡和自噬起着重要的调控作用。

我们以星孢菌素（staurosporine）诱导神经细胞损伤，研究了细胞损伤过程中Caspase介导的Beclin 1剪切，分析了剪切体的分布特点和作用机制。结果显示，星孢菌素显著增加Beclin 1剪切体的形成，剪切体发生部分核内移，Caspase抑制剂可以逆转上述现象；Beclin 1 C端剪切片段加剧细胞凋亡；细胞内过表达Beclin 1 D146/149A突变质粒，可以有效抵抗STS诱导的细胞凋亡。此外，亚精胺（spermidine）亦能通过抑制Beclin 1剪切，延缓细胞死亡。我们的研究结果提示，Caspase介导的Beclin 1的剪切在神经细胞损伤过程中具有重要的调控作用，干预剪切体的形成可显著抑制细胞损伤。

杨永华 复旦大学药学院

演讲题目： Mevastatin通过抑制自噬溶酶体的形成促进HDACi诱导乳腺癌细胞凋亡

演讲摘要：

自噬在肿瘤发展过程中对肿瘤细胞生存和死亡信号通路有重要的调节作用，Vps34是自噬体形成的关键分子，自噬体和溶酶体融合形成自噬溶酶体降解细胞内受损蛋白及其他生物质，自噬通过其特异性底物P62体现其活性，Vps34和P62对肿瘤发展都起着十分重要的作用。以自噬为靶标的肿瘤干预可能成为肿瘤防治的新手段。

甲羟戊酸途径(Mevalonate pathway)和细胞自噬密切相关，尤其是影响自噬体和溶酶体融合所需small GTPase(Rab 7等)的活性离不开异戊烯化修饰。我们将演示组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）与HMG-CoA reductase （HMGCR）抑制剂mevastatin联用在肿瘤干预中的作用机制。结果表明，虽然HDACi和mevastatin及其组合都能降低P62水平，也可以降低Vps34水平，但它们都是细胞凋亡因子半胱氨酸蛋白酶-8（Casp 8）的底物分子。此外，小鼠实验结果表明，mevastatin可以增强HDACi的抗癌活性。

该研究表明，抑制自噬体与溶酶体融合的策略是发现抗癌药物的有效方法。

陈志华 浙江大学医学院附属第二医院

演讲题目：MTOR-细胞自噬与气道上皮损伤

演讲摘要：

MTOR-细胞自噬信号通路能调控各种生理病理机能，如细胞增殖，分化，凋亡，炎症反应等，然而其在各种呼吸系统疾病中的调控作用并没有得到很好的研究。我们发现MTOR-细胞自噬在各种因素如香烟烟雾，过敏原，大气污染颗粒以及内毒素等诱导的气道上皮细胞损伤中都能起到关键调控作用，而且更有意思的是，对于不同因素引起的气道上皮细胞损伤，MTOR-细胞自噬在损伤过程中所起到的调控作用可能截然不同。在气道上皮细胞特异性的MTOR基因敲除小鼠或者细胞自噬相关基因BECN1和LC3B缺陷的小鼠中，各种外界刺激诱导的气道上皮细胞凋亡，气道炎症反应，气道粘液高分泌，以及气道上皮细胞间充质转化等。

花芳 中国医学科学院药物研究所

演讲题目：p62-TRIB3相互作用阻断自噬，连接糖尿病与肿瘤的关键纽带

演讲摘要：

流行病学研究表明，糖尿病增加肝癌、胰腺癌、乳腺癌、胃癌和结直肠癌等多种肿瘤的发病风险和死亡率。糖尿病中广泛存在的代谢风险因素，例如高胰岛素血症，高IGF-1，高血糖等参与肿瘤的发生和发展，但确切分子机制尚未阐明。假性激酶蛋白TRIB3参与糖脂代谢调节，也在肿瘤中发挥重要调节功能。我们发现多种肿瘤组织中TRIB3和pIRS表达增高，且与肿瘤的不良预后正相关。Insulin，IGF-1，高血糖等均能诱导TRIB3表达增加，敲低肿瘤细胞中TRB3表达抑制Insulin/IGF的促肿瘤作用。在KK-Ay糖尿病小鼠中，TRB3在多个脏器的表达显著高于普通C57小鼠；敲低KK-Ay糖尿病小鼠TRB3表达抑制肿瘤生长和转移。肿瘤中高表达的TRB3能与选择性自噬“货车”受体p62相互作用，抑制p62与LC3以及与泛素化底物蛋白的结合，进而抑制细胞自噬。自噬抑制导致p62大量堆积，进一步对泛素-蛋白酶体途径产生干扰。自噬和蛋白酶体两大降解途径的功能障碍导致p62以及多种促肿瘤因子堆积，促进肿瘤恶性进展。我们从p62蛋白序列中筛选到能干扰TRB3与p62相互作用的螺旋肽，该多肽具有抑制肿瘤生长和转移的能力。我们的工作阐明了糖尿病人群肿瘤高发的分子机制，并证明p62/TRB3相互作用可能是潜在的肿瘤治疗靶点。

吴哲褒 上海交通大学附属瑞金医院

演讲题目：垂体泌乳素腺瘤药物治疗：自噬的角色？

演讲摘要：

垂体腺瘤的人群发现率为22%，其中泌乳素腺瘤占40%。泌乳素腺瘤首选药物治疗，即多巴胺受体激动剂（DA），包括溴隐亭和卡麦角林。以往研究认为，DA激动D2R受体，尤其是其短链的D2S，诱导细胞凋亡，从而导致PRL减低和肿瘤缩小。我们最新的研究进一步发现，卡麦角林通过抑制AKT-MTOR通路诱导自噬，同时，通过DR引起溶酶体PH值改变，从而导致溶酶体相应的蛋白酶失活，自噬潮受阻，产生大量的自噬泡集聚，最终细胞无法消化，导致细胞死亡（ACD）。最后，我们将讨论这一发现对临床应用潜在的巨大应用价值。

卫立辛 第二军医大学附属东方肝胆医院

演讲题目：自噬参与肝癌发生过程中恶劣生态环境对细胞生存选择的机制研究

演讲摘要：

肝癌发生早期，慢性病毒感染、酒精性刺激、脂肪沉积等因素都会导致肝组织炎症浸润、缺血、缺氧、代谢紊乱等。在这种恶劣的生态环境中，正常肝细胞被破坏发生凋亡或坏死，但HPCs却存活下来，进一步恶化形成肝癌，而自噬可能是肝癌细胞适应恶劣生态环境的主要机制。我们前期在HBV相关肝癌组织标本中发现不表达HBV相关受体的HPCs与癌旁炎症分级呈正相关，在这种炎症微环境存活下来的HPCs进一步形成的肝癌细胞也不表达HBV相关受体，因而不被HBV感染；炎症因子能明显促进肝癌细胞EMT进而提高其侵袭转移能力，抑制自噬后，肝癌细胞EMT和侵袭转移能力下降；缺氧缺营养情况下，肝癌细胞通过自噬抵抗化疗药物诱导的凋亡，而且肝癌干细胞比例会明显增加；在肿瘤形成期和发展期用自噬抑制剂进行干预分别具有促癌和抑癌的双向作用。上述研究结果提示恶劣生态环境是影响肝癌发生发展的重要因素，通过研究微环境对肿瘤细胞自噬的影响，可以为进一步寻找干预恶劣微环境的靶点打下基础。